Osnovni koncepti vezani za promociju koagulacije

Princip antikoagulansa i primjena uobičajenih antikoagulansa

1. Heparin je poželjni antikoagulant za detekciju hemijskog sastava krvi.Heparin je mukopolisaharid koji sadrži sulfatnu grupu, a prosječna molekulska težina dispergirane faze je 15000. Njegov antikoagulacijski princip je uglavnom da se kombinuje sa antitrombinom III da izazove promjene u konfiguraciji antitrombina III i ubrza stvaranje trombin trombinskog kompleksa za proizvodnju antikoagulacije .Osim toga, heparin može inhibirati trombin uz pomoć kofaktora plazme (heparin kofaktor II).Uobičajeni heparinski antikoagulansi su natrijum, kalijum, litijum i amonijum soli heparina, među kojima je najbolji litijum heparin, ali je njegova cena skupa.Soli natrijuma i kalija povećat će sadržaj natrijuma i kalija u krvi, a amonijeve soli će povećati sadržaj dušika uree.Doza heparina za antikoagulaciju je obično 10,0 ～ 12,5 IU/ml krvi.Heparin manje interferira sa komponentama krvi, ne utiče na volumen crvenih krvnih zrnaca i ne izaziva hemolizu.Pogodan je za test permeabilnosti ćelija, krvne gasove, propusnosti plazme, hematokrita i opšte biohemijsko određivanje.Međutim, heparin ima antitrombinsko djelovanje i nije prikladan za test koagulacije krvi.Osim toga, prekomjerna količina heparina može uzrokovati agregaciju leukocita i trombocitopeniju, pa nije pogodan za klasifikaciju leukocita i brojanje trombocita, niti za test hemostaze. Osim toga, heparinski antikoagulant se ne može koristiti za izradu razmaza krvi, jer se nakon bojenja po Wrightu pojavljuje tamnoplava pozadina. , što utiče na smanjenje mikroskopske proizvodnje.Heparin antikoagulaciju treba koristiti kratko, inače krv može da se zgruša nakon predugog stavljanja

2. EDTA so.EDTA se može kombinovati sa Ca2+ u krvi i formirati kelat.Proces koagulacije je blokiran i krv ne može koagulirati EDTA soli uključujući kalijeve, natrijeve i litijeve soli.Međunarodni komitet za hematologiju za standardizaciju preporučuje upotrebu EDTA-K2, koji ima najveću rastvorljivost i najveću brzinu antikoagulacije.EDTA so se obično priprema u vodeni rastvor sa masenim udelom od 15%.Dodati 1,2mgEDTA po ml krvi, odnosno dodati 0,04ml 15% rastvora EDTA na 5ml krvi.EDTA so se može sušiti na 100 ℃, a njen antikoagulacijski učinak ostaje nepromijenjen EDTA sol ne utječe na broj i veličinu bijelih krvnih zrnaca, najmanje utječe na morfologiju crvenih krvnih stanica, inhibira agregaciju trombocita i pogodna je za opće hematološke detekcija.Ako je koncentracija antikoagulansa previsoka, osmotski pritisak će porasti, što će uzrokovati skupljanje ćelije. pH rastvora EDTA ima veliku vezu sa solima, a nizak pH može izazvati širenje ćelije.EDTA-K2 može malo povećati volumen crvenih krvnih zrnaca, a prosječni volumen trombocita u kratkom vremenu nakon uzimanja krvi je vrlo nestabilan i ima tendenciju da bude stabilan nakon pola sata.EDTA-K2 je smanjio Ca2+, Mg2+, kreatin kinazu i alkalnu fosfatazu.Optimalna koncentracija EDTA-K2 bila je 1,5 mg/ml krvi.Ako ima malo krvi, neutrofili će nabubriti, lobulirati i nestati, trombociti će nabubriti i dezintegrirati, stvarajući fragmente normalnih trombocita, što će dovesti do grešaka u rezultatima analize. EDTA soli mogu inhibirati ili ometati polimerizaciju fibrinskih monomera tokom formiranja. fibrinskih ugrušaka, koji nije pogodan za otkrivanje zgrušavanja krvi i funkcije trombocita, kao ni za određivanje kalcijuma, kalija, natrijuma i dušičnih supstanci.Osim toga, EDTA može uticati na aktivnost nekih enzima i inhibirati faktor lupus eritematozusa, pa nije pogodan za pravljenje histohemijskog bojenja i ispitivanje krvnog razmaza ćelija lupusa eritematozusa.

3. Citrat je uglavnom natrijum citrat.Njegov antikoagulacijski princip je da se može kombinovati sa Ca2+ u krvi i formirati kelat, tako da Ca2+ gubi svoju koagulacionu funkciju i proces koagulacije je blokiran, čime se sprečava zgrušavanje krvi.Natrijum citrat ima dve vrste kristala, Na3C6H5O7 · 2H2O i 2Na3C6H5O7 · 11H2O, obično 3,8% ili 3 sa prvim.2% vodeni rastvor, pomešan sa krvlju u zapremini 1:9.Većina testova koagulacije može se antikoagulirati natrijum citratom, koji pomaže stabilnosti faktora V i faktora VIII, a ima mali uticaj na prosječni volumen trombocita i druge faktore koagulacije, pa se može koristiti za analizu funkcije trombocita.Natrijum citrat ima manju citotoksičnost i takođe je jedna od komponenti tečnosti za održavanje krvi u transfuziji krvi.Međutim, natrijum citrat 6mg može antikoagulirati 1ml krvi, koja je jako alkalna i nije pogodna za analizu krvi i biohemijske testove.