Osnovni pojmovi vezani uz poticanje koagulacije

Antikoagulantni princip i primjena uobičajenih antikoagulansa

1. Heparin je preferirani antikoagulans za određivanje kemijskog sastava krvi.Heparin je mukopolisaharid koji sadrži sulfatnu skupinu, a prosječna molekularna težina dispergirane faze je 15000. Njegovo antikoagulacijsko načelo je uglavnom kombiniranje s antitrombinom III kako bi se izazvale promjene u konfiguraciji antitrombina III i ubrzalo stvaranje kompleksa trombina i trombina za proizvodnju antikoagulansa .Osim toga, heparin može inhibirati trombin uz pomoć kofaktora plazme (kofaktor heparina II).Uobičajeni heparinski antikoagulansi su natrijeve, kalijeve, litijeve i amonijeve soli heparina, među kojima je najbolji litijev heparin, ali je njegova cijena skupa.Natrijeve i kalijeve soli će povećati sadržaj natrija i kalija u krvi, a amonijeve soli će povećati sadržaj dušika iz uree.Doza heparina za antikoagulaciju obično je 10,0 ～ 12,5 IU/ml krvi.Heparin manje interferira s sastojcima krvi, ne utječe na volumen crvenih krvnih stanica i ne uzrokuje hemolizu.Pogodan je za test propusnosti stanica, plinove u krvi, propusnost plazme, hematokrit i opće biokemijsko određivanje.Međutim, heparin ima antitrombinski učinak i nije prikladan za ispitivanje koagulacije krvi.Osim toga, prekomjerna količina heparina može uzrokovati agregaciju leukocita i trombocitopeniju, stoga nije prikladan za klasifikaciju leukocita i brojanje trombocita, niti za test hemostaze. Osim toga, heparinska antikoagulacija ne može se koristiti za izradu krvnih razmaza, jer se tamnoplava pozadina pojavljuje nakon bojenja po Wrightu , što utječe na smanjenje mikroskopske produkcije.Heparinske antikoagulante treba koristiti kratko vrijeme, inače se krv može zgrušati nakon predugog postavljanja

2. EDTA sol.EDTA se može spojiti s Ca2+ u krvi i stvoriti kelat.Proces koagulacije je blokiran i krv ne može koagulirati EDTA soli uključuju soli kalija, natrija i litija.Međunarodni hematološki standardizacijski odbor preporučuje korištenje EDTA-K2, koji ima najveću topljivost i najveću brzinu antikoagulacije.EDTA sol se obično priprema u vodenu otopinu s masenim udjelom od 15%.Dodajte 1,2mgEDTA na ml krvi, odnosno dodajte 0,04ml 15% otopine EDTA na 5ml krvi.EDTA sol se može sušiti na 100 ℃, a njen antikoagulacijski učinak ostaje nepromijenjen. EDTA sol ne utječe na broj i veličinu bijelih krvnih stanica, najmanje utječe na morfologiju crvenih krvnih stanica, inhibira agregaciju trombocita, te je pogodna za opće hematološke otkrivanje.Ako je koncentracija antikoagulansa previsoka, osmotski tlak će porasti, što će uzrokovati skupljanje stanica. pH otopine EDTA ima odličan odnos sa solima, a nizak pH može uzrokovati širenje stanica.EDTA-K2 može malo povećati volumen crvenih krvnih stanica, a prosječni volumen trombocita u kratkom vremenu nakon uzimanja krvi je vrlo nestabilan i ima tendenciju da bude stabilan nakon pola sata.EDTA-K2 smanjio je Ca2+, Mg2+, kreatin kinazu i alkalnu fosfatazu.Optimalna koncentracija EDTA-K2 bila je 1,5 mg/ml krvi.Ako ima malo krvi, neutrofili će nabubriti, lobulirati i nestati, trombociti će nabubriti i raspasti se, stvarajući fragmente normalnih trombocita, što će dovesti do pogrešaka u rezultatima analize. EDTA soli mogu inhibirati ili ometati polimerizaciju fibrinskih monomera tijekom stvaranja fibrinskih ugrušaka, što nije prikladno za određivanje zgrušavanja krvi i funkcije trombocita, niti za određivanje kalcija, kalija, natrija i dušičnih tvari.Osim toga, EDTA može utjecati na aktivnost nekih enzima i inhibirati faktor lupus erythematosus, stoga nije prikladan za histokemijsko bojenje i ispitivanje krvnog razmaza stanica lupus erythematosus.

3. Citrat je uglavnom natrijev citrat.Njegovo antikoagulacijsko načelo je da se može spojiti s Ca2+ u krvi u kelat, tako da Ca2+ gubi svoju koagulacijsku funkciju i proces koagulacije je blokiran, čime se sprječava zgrušavanje krvi.Natrijev citrat ima dvije vrste kristala, Na3C6H5O7 · 2H2O i 2Na3C6H5O7 · 11H2O, obično 3,8% ili 3 s prvim.2% vodena otopina, pomiješana s krvlju u volumenu 1:9.Većina koagulacijskih testova može se antikoagulirati s natrijevim citratom, koji je od pomoći za stabilnost faktora V i faktora VIII, a ima mali utjecaj na prosječni volumen trombocita i druge faktore koagulacije, tako da se može koristiti za analizu funkcije trombocita.Natrijev citrat ima manju citotoksičnost i također je jedna od komponenti tekućine za održavanje krvi u transfuziji krvi.Međutim, natrijev citrat od 6 mg može antikoagulirati 1 ml krvi, koja je jako alkalna i nije prikladna za analizu krvi i biokemijske pretrage.