የመለያየት ሙጫ እንዴት መጠቀም ይቻላል?- ክፍል 1

የመለያየት ሙጫ እንዴት መጠቀም ይቻላል?

የምዕራባዊ ነጠብጣብ ሽፋን ማስተላለፍ

አሁን ባለው ድርጊት ፕሮቲን ከጄል ወደ ጠንካራ ተሸካሚ (ሜምብራን) ይተላለፋል.

Membrane ምርጫ፡- በማተም ላይ በብዛት ጥቅም ላይ የሚውሉት ጠንካራ-ደረጃ ቁሶች NC membrane፣ DBM፣ ዲዲቲ፣ ናይሎን ሽፋን፣ ፒቪዲኤፍ፣ ወዘተ. PVDF (polyvinylidene fluoride)ን እንመርጣለን፣ እሱም የተሻለ የፕሮቲን ማስታወቂያ፣ አካላዊ ጥንካሬ እና የተሻለ ኬሚካላዊ ተኳኋኝነት ያለው።ሁለት መመዘኛዎች አሉ፡- immobilon-p (0.45um) እና immobilon PSQ (0.2um ለMW <20kDa)።

በከፊል ደረቅ ዘዴ

ይህም, ጄል interlayer ጥምር ማስተላለፊያ ቋት ጋር ማጣሪያ ወረቀት መካከል የተቀመጠ ነው, እና የአሁኑ ማስተላለፍ ውጤት ለማሳካት ማጣሪያ ወረቀት ላይ adsorbed ቋት በኩል ይካሄዳል.አሁኑኑ በቀጥታ በፊልም ሙጫ ላይ ስለሚሰራ, የዝውውር ሁኔታዎች በአንጻራዊ ሁኔታ አስቸጋሪ ናቸው, ነገር ግን የዝውውር ጊዜ አጭር እና ውጤታማነቱ ከፍተኛ ነው.

(1) የሙከራ ሁኔታዎች ምርጫ

የአሁኑ 1ma-2ma / ሴሜ 2 ነው, እና እኛ ብዙውን ጊዜ 100mA / membrane እንጠቀማለን.የማስተላለፊያው ጊዜ እንደ ዒላማው የፕሮቲን ሞለኪውል እና የጄል ክምችት መጠን ሊመረጥ ይችላል, እና እንደ ትክክለኛው ሁኔታ በትክክል ማስተካከል ይቻላል.

ዒላማ ፕሮቲን ሞለኪውላዊ መጠን (kDa), ጄል ትኩረት እና ማስተላለፍ ጊዜ

80---140 8% 1.5-2.0

25---80 10% 1.5

15-40 12% 0.75

<20 15% 0.5

(2) የሙከራ አሠራር

(1) የማጣሪያ ወረቀት እና ሽፋን ማዘጋጀት (ዝግጅቱ ከኤሌክትሮፊዮሬሲስ 20 ደቂቃዎች በፊት መጀመር አለበት).

ሀ. ወዲያውኑ ያልተዘጋጁ በቂ የዝውውር መያዣዎች መኖራቸውን ያረጋግጡ።

ለ. ትክክለኛ መጠን ያለው የማጣሪያ ወረቀት እና ሽፋን መኖሩን ያረጋግጡ።

ሐ. ሽፋኑን በሜታኖል ውስጥ ለ1-2 ደቂቃ ያህል አጥለቅልቀው።እና ከዚያ ወደ ማስተላለፊያ ቋት ተላልፏል።

መ. ተገቢውን የማጣበቂያ ማጣሪያ ወረቀት እና የሜምፕል ማጣሪያ ወረቀት ወደ ማስተላለፊያ ቋት በቅደም ተከተል ይንከሩት።

የማስተላለፊያ ቋት ውስጥ ሲገቡ የፒዲቪኤፍ ሽፋን በሜታኖል ውስጥ ምን ያህል መጠጣት አለበት?

PVDF ሃይድሮፎቢክ ነው, እና በማስተላለፊያ ቋት ውስጥ ለመጥለቅ አስቸጋሪ ነው.ከሜታኖል ሕክምና በኋላ, ለመጥለቅ ቀላል ነው.የ PVDF ቅድመ-ህክምና በሜታኖል እንዲረጭ እና እንዲነቃ ማድረግ እና ከዚያም በደንብ ከጠለቀ በኋላ ሁለት ጊዜ በንፋስ ውሃ መታጠብ ነው.ሜታኖል አረፋዎችን የመጠቀም ዓላማ በ PVDF ሽፋን ላይ አዎንታዊ ኃይል ያላቸውን ቡድኖች ለማንቃት እና በአሉታዊ ኃይል ከተሞሉ ፕሮቲኖች ጋር ለማገናኘት ቀላል ለማድረግ ነው።

ሰዎች ብዙውን ጊዜ ለ 5-20 ደቂቃዎች ይጠቀማሉ.ሙጫውን ከመውሰዱ ጋር በተመሳሳይ ጊዜ ሊጠጣ ይችላል, እና 5 ደቂቃ ያህል እንደሚወስድ ይገመታል.ውጤቱ መጥፎ አይደለም.ቀደም ባሉት ጊዜያት አንዳንድ የዌብ ወዳጆች የማቀነባበሪያው ጊዜ ብዙም ለውጥ አያመጣም ነገር ግን ዋናው ነገር የፊልሙ ጥራት ነው ብለው ለጥፈዋል።ያ እውነት ነው.ሽፋኑ ሙሉ በሙሉ እስኪጠመቅ ድረስ, ደህና መሆን አለበት.

የሃይቦንድ ፒቪዲኤፍ ዝርዝር መግለጫ እንደሚከተለው ይነበባል፡- “ገለባውን በ100% ሜታኖል (10 ሰከንድ) ቀድመው ያጥቡት”።የእኔ ግንዛቤ ቢያንስ ለ10 ሰከንድ ያህል መታጠብ ምንም ችግር የለውም።እንደውም ለ10 ሰከንድ ወይም ለ10 ደቂቃ መታጠብ ምንም ችግር የለውም።

(2) ማስተላለፍ

A. የታችኛውን የማጣሪያ ወረቀት በኤሌክትሪክ ማስተላለፊያ መሳሪያው ላይ ያስቀምጡ.በአጠቃላይ ሶስት ንብርብሮች ጥቅም ላይ ይውላሉ.

ለ. ሽፋኑን በማጣሪያ ወረቀቱ ላይ ከገለባው ጋር በማነፃፀር በገለባው እና በማጣሪያ ወረቀቱ መካከል አረፋ እንዳይኖር ትኩረት ይስጡ እና ሽፋኑን እርጥብ ለማድረግ አንዳንድ የማስተላለፊያ ቋት በገለባው ላይ ያፈሱ።

C. ሙጫውን ይንቀሉት, የተቆለሉትን ጄል ያስወግዱ እና በጥንቃቄ ወደ ፊልሙ ይውሰዱት.

መ. የፊልሙን የላይኛው ግራ ጥግ ቆርጠህ በፊልሙ ላይ ያለውን ሙጫ ቦታ በእርሳስ ምልክት አድርግ።

E. በማጣበቂያው ላይ ባለው ሙጫ ላይ የተጣራ ወረቀት ይሸፍኑ.ጥቂት የማስተላለፊያ ቋት አፍስሱ እና ሁለት የተጣራ ወረቀት ያስቀምጡ።

ረ. የኤሌክትሪክ ማስተላለፊያ መሳሪያውን ይጫኑ እና እንደፍላጎቱ አስፈላጊውን ወቅታዊ እና ጊዜ ይምረጡ.

G. በማስተላለፊያው ሂደት ውስጥ የቮልቴጅ ለውጥ በማንኛውም ጊዜ መታየት አለበት, እና ማንኛውም ያልተለመዱ ነገሮች በጊዜ ውስጥ መስተካከል አለባቸው.