ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ଆଲୁ କିପରି ବ୍ୟବହାର କରିବେ?- ଭାଗ 1

ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା ଆଲୁ କିପରି ବ୍ୟବହାର କରିବେ?

ପାଶ୍ଚାତ୍ୟ ବ୍ଲଟ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତର |

କରେଣ୍ଟର କ୍ରିୟା ଅନୁଯାୟୀ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଜେଲରୁ କଠିନ ବାହକ (ମେମ୍ବ୍ରେନ୍) କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ |

ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଚୟନ: ଛାପିବାରେ ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ କଠିନ-ପର୍ଯ୍ୟାୟ ସାମଗ୍ରୀଗୁଡ଼ିକରେ ଏନସି ମେମ୍ବ୍ରେନ୍, DBM, DDT, ନାଇଲନ୍ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍, PVDF ଇତ୍ୟାଦି ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଦୁଇଟି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଅଛି: ଇମୋବିଲନ୍- p (0.45um) ଏବଂ ଇମୋବିଲନ୍ PSQ (MW <20kDa ପାଇଁ 0.2um) |

ଏକ ଅର୍ଦ୍ଧ ଶୁଷ୍କ ପଦ୍ଧତି |

ତାହା ହେଉଛି, ଟ୍ରାନ୍ସଫର ବଫର ସହିତ ଫିଲ୍ଟର ପେପର ମଧ୍ୟରେ ଜେଲ ଇଣ୍ଟରଲେୟର ମିଶ୍ରଣ ରଖାଯାଏ, ଏବଂ ଟ୍ରାନ୍ସଫର ପ୍ରଭାବ ହାସଲ କରିବା ପାଇଁ ଫିଲ୍ଟର ପେପରରେ ଆଡର୍ସଡ୍ ହୋଇଥିବା ବଫର୍ ମାଧ୍ୟମରେ କରେଣ୍ଟ ପରିଚାଳିତ ହୁଏ |କାରଣ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ଚଳଚ୍ଚିତ୍ର ଗ୍ଲୁ ଉପରେ ସିଧାସଳଖ କାର୍ଯ୍ୟ କରେ, ସ୍ଥାନାନ୍ତର ଅବସ୍ଥା ଅପେକ୍ଷାକୃତ କଠିନ, କିନ୍ତୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ସମୟ ସ୍ୱଳ୍ପ ଏବଂ ଦକ୍ଷତା ଅଧିକ |

(1) ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଅବସ୍ଥା ଚୟନ |

କରେଣ୍ଟ ହେଉଛି 1ma-2ma / cm2, ଏବଂ ଆମେ ସାଧାରଣତ 100 100mA / membrane ବ୍ୟବହାର କରୁ |ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ସମୟକୁ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଧାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅଣୁ ଏବଂ ଜେଲ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁଯାୟୀ ଚୟନ କରାଯାଇପାରିବ ଏବଂ ପ୍ରକୃତ ପରିସ୍ଥିତି ଅନୁଯାୟୀ ଉପଯୁକ୍ତ ଭାବରେ ସଜାଡିହେବ |

ଟାର୍ଗେଟ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ ମଲିକୁଲାର୍ ସାଇଜ୍ (kDa), ଜେଲ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ସମୟ |

80 --- 140 8% 1.5-2.0

25 --- 80 10% 1.5

15-40 12% 0.75

<20 15% 0.5

(୨) ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ କାର୍ଯ୍ୟ |

(1) ଫିଲ୍ଟର ପେପର ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ପ୍ରସ୍ତୁତି (ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ପୂର୍ବରୁ 20 ମିନିଟ୍ ପୂର୍ବରୁ ପ୍ରସ୍ତୁତି ଆରମ୍ଭ ହେବ) |

ଉ: ଯଥେଷ୍ଟ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ବଫର୍ ଅଛି କି ନାହିଁ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ, ଯାହା ତୁରନ୍ତ ପ୍ରସ୍ତୁତ ନୁହେଁ |

B. ସଠିକ୍ ଆକାରର ଫିଲ୍ଟର କାଗଜ ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଅଛି କି ନାହିଁ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ |

C. ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ପ୍ରାୟ 1-2 ମିନିଟ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବୁଡ଼ାନ୍ତୁ |ଏବଂ ତାପରେ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ବଫରକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ |

D. ଉପଯୁକ୍ତ ଆଡେସିଭ୍ ଫିଲ୍ଟର୍ ପେପର ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଫିଲ୍ଟର ପେପରକୁ ଯଥାକ୍ରମେ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ବଫରରେ ଭିଜାନ୍ତୁ |

ଟ୍ରାନ୍ସଫର ବଫରରେ ପ୍ରବେଶ କରିବା ସମୟରେ PDVF ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ମିଥାନୋଲରେ କେତେ ସମୟ ଭିଜିବା ଉଚିତ୍?

PVDF ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିକ୍, ଏବଂ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ବଫରରେ ଭିଜାଇବା କଷ୍ଟକର |ମିଥାନୋଲ ଚିକିତ୍ସା ପରେ, ଏହାକୁ ଭିଜାଇବା ସହଜ ହୋଇଥାଏ |PVDF ର ପ୍ରବୃତ୍ତି ହେଉଛି ଏହାକୁ ମିଥାନୋଲ୍ ସହିତ ଭିଜାଇ ସକ୍ରିୟ କରିବା, ଏବଂ ଭଲଭାବେ ଭିଜିବା ପରେ ଏହାକୁ ଦୁଇଥର ଡିଷ୍ଟିଲ୍ ପାଣିରେ ଧୋଇବା |ମିଥାନୋଲ୍ ବୁବୁଲ୍ସ ବ୍ୟବହାର କରିବାର ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ହେଉଛି PVDF ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ ସକରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜ ହୋଇଥିବା ଗୋଷ୍ଠୀକୁ ସକ୍ରିୟ କରିବା ଏବଂ ନକାରାତ୍ମକ ଚାର୍ଜଯୁକ୍ତ ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧିବା ସହଜ କରିବା |

ଲୋକମାନେ ସାଧାରଣତ 5 ଏହାକୁ 5-20 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତି |ଆଲୁଅ ନେବା ସହିତ ଏହାକୁ ଏକ ସମୟରେ ଭିଜାଇ ଦିଆଯାଇପାରେ ଏବଂ ଏହା ପ୍ରାୟ 5 ମିନିଟ୍ ଲାଗିବ ବୋଲି ଆକଳନ କରାଯାଇଛି |ଏହାର ପ୍ରଭାବ ଖରାପ ନୁହେଁ |ଅତୀତରେ, କିଛି ୱେବଫ୍ରେଣ୍ଡ ପୋଷ୍ଟ କରିଥିଲେ ଯେ ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ସମୟ ଅଧିକ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ନୁହେଁ, କିନ୍ତୁ ଚାବିଟି ହେଉଛି ଫିଲ୍ମର ଗୁଣବତ୍ତା |ତାହା ସତ।ଯେପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଭିଜାଯାଏ, ଏହା ଠିକ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ |

ହାଇବଣ୍ଡର PVDF ସ୍ପେସିଫିକେସନ୍ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ପ s ଼ିଛି: "100% ମେଟାନୋଲ (10 ସେକେଣ୍ଡ) ରେ ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ପୂର୍ବରୁ ଓଦା କର" |ମୋର ବୁ understanding ାମଣା ହେଉଛି ଅତି କମରେ 10 ସେକେଣ୍ଡ ପାଇଁ ଭିଜାଇବା ଠିକ୍ |ବାସ୍ତବରେ, 10 ସେକେଣ୍ଡ କିମ୍ବା 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଭିଜାଇବା ଠିକ୍ |

(୨) ସ୍ଥାନାନ୍ତର |

ଉ: ବ electric ଦ୍ୟୁତିକ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ଯନ୍ତ୍ରରେ ନିମ୍ନ ଫିଲ୍ଟର କାଗଜ ରଖନ୍ତୁ |ସାଧାରଣତ three ତିନୋଟି ସ୍ତର ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |

B. ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ ଫିଲ୍ଟର୍ ପେପର ଉପରେ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ରଖନ୍ତୁ, ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଏବଂ ଫିଲ୍ଟର ପେପର ମଧ୍ୟରେ ବୁବୁଲ ନହେବାକୁ ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ, ଏବଂ ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ଓଦା ରଖିବା ପାଇଁ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ କିଛି ଟ୍ରାନ୍ସଫର୍ ବଫର୍ pour ାଳନ୍ତୁ |

C. ଆଲୁରୁ ଛାଣି ଦିଅନ୍ତୁ, ଷ୍ଟାକ ଜେଲକୁ ବାହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଏହାକୁ ଯତ୍ନର ସହିତ ଫିଲ୍ମ ଉପରେ ଘୁଞ୍ଚାନ୍ତୁ |

D. ଫିଲ୍ମର ଉପର ବାମ କୋଣକୁ କାଟି ଏକ ପେନ୍ସିଲ୍ ସହିତ ଫିଲ୍ମରେ ଆଲୁ ପୋଜିସନ୍ ଚିହ୍ନିତ କର |

ଇ।କିଛି ସ୍ଥାନାନ୍ତର ବଫର୍ our ାଳନ୍ତୁ ଏବଂ ଦୁଇଟି ଖଣ୍ଡ ଫିଲ୍ଟର କାଗଜ ରଖନ୍ତୁ |

F. ବ electric ଦ୍ୟୁତିକ ସ୍ଥାନାନ୍ତର ଉପକରଣ ସ୍ଥାପନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ ଆବଶ୍ୟକ କରେଣ୍ଟ ଏବଂ ସମୟ ଚୟନ କରନ୍ତୁ |

ଜି ସ୍ଥାନାନ୍ତର ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମୟରେ, ଭୋଲ୍ଟେଜ୍ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଯେକ time ଣସି ସମୟରେ ପାଳନ କରାଯିବ ଏବଂ ଯେକ any ଣସି ଅସ୍ୱାଭାବିକତା ଠିକ୍ ସମୟରେ ସଜାଡାଯିବ |