Bawo ni lati lo lẹ pọ Iyapa?- apakan 1

Bawo ni lati lo lẹ pọ Iyapa?

Western abawọn tanna gbigbe

Labẹ iṣẹ ti lọwọlọwọ, a ti gbe amuaradagba lati inu gel si agbẹ ti o lagbara (membrane).

Aṣayan Membrane: awọn ohun elo ti o lagbara-alakoso ti o wọpọ ni titẹ sita pẹlu awọ-ara NC, DBM, DDT, membran nylon, PVDF, bbl A yan PVDF (polyvinylidene fluoride), eyiti o ni ipolowo amuaradagba to dara julọ, agbara ti ara ati ibaramu kemikali to dara julọ.Awọn pato meji wa: immobilon-p (0.45um) ati immobilon PSQ (0.2um fun MW <20kDa).

A ologbele gbẹ ọna

Iyẹn ni, apapo interlayer gel ti wa ni gbe laarin iwe àlẹmọ pẹlu ifipamọ gbigbe, ati lọwọlọwọ ni a ṣe nipasẹ ifipamọ ti a fi si ori iwe àlẹmọ lati ṣaṣeyọri ipa gbigbe.Nitoripe lọwọlọwọ n ṣiṣẹ taara lori lẹ pọ fiimu, awọn ipo gbigbe jẹ iwọn lile, ṣugbọn akoko gbigbe jẹ kukuru ati ṣiṣe jẹ giga.

(1) asayan ti esiperimenta awọn ipo

Awọn lọwọlọwọ jẹ 1ma-2ma / cm2, ati pe a maa n lo 100mA / awo.Akoko gbigbe ni a le yan ni ibamu si iwọn moleku amuaradagba afojusun ati ifọkansi gel, ati pe o le ṣatunṣe ni deede ni ibamu si ipo gangan.

Iwọn molikula amuaradagba afojusun (kDa), ifọkansi gel ati akoko gbigbe

80---140 8% 1.5-2.0

25---80 10% 1,5

15-40 12% 0,75

<20 15% 0.5

(2) esiperimenta isẹ

(1) Igbaradi ti iwe àlẹmọ ati awọ ara (igbaradi yoo bẹrẹ ni iṣẹju 20 ṣaaju ki o to electrophoresis).

A. Ṣayẹwo boya awọn buffers gbigbe wa to, eyiti ko pese sile lẹsẹkẹsẹ.

B. Ṣayẹwo boya iwe àlẹmọ wa ati awọ ara ti iwọn to dara.

C. Fi awọ ara ilu bọ inu methanol fun bii iṣẹju 1-2.Ati lẹhinna gbe lọ si ifipamọ gbigbe.

D. Rẹ iwe àlẹmọ alemora ti o yẹ ati iwe àlẹmọ awo ilu sinu ifipamọ gbigbe ni atele.

Bawo ni pipẹ ti awọ awo PDVF yẹ ki o wọ sinu kẹmika ti methanol nigbati o ba nwọle ifipamọ gbigbe?

PVDF jẹ hydrophobic, ati awọn ti o jẹ soro lati Rẹ ni gbigbe saarin.Lẹhin itọju methanol, o rọrun lati rẹ.Itọju iṣaaju ti PVDF ni lati rọ ati mu ṣiṣẹ pẹlu kẹmika ti methanol, lẹhinna wẹ lẹẹmeji pẹlu omi distilled lẹhin gbigbe daradara.Idi ti lilo awọn nyoju methanol ni lati mu awọn ẹgbẹ ti o ni idiyele daadaa ṣiṣẹ lori awo awọ PVDF ati jẹ ki o rọrun lati dipọ pẹlu awọn ọlọjẹ ti ko ni agbara.

Awọn eniyan maa n lo fun awọn iṣẹju 5-20.O le wa ni sinu ni akoko kanna bi mu awọn lẹ pọ, ati awọn ti o ti wa ni ifoju-wipe o yoo gba nipa 5 iṣẹju.Ipa naa ko buru.Ni atijo, diẹ ninu awọn webfriends Pipa Pipa pe awọn processing akoko ko ni pataki Elo, ṣugbọn awọn bọtini ni awọn didara ti awọn fiimu.Ooto ni yeno.Niwọn igba ti awọ ara ti wa ni kikun, o yẹ ki o dara.

Sipesifikesonu PVDF Hybond ka bi atẹle: “ṣaaju tutu awo awọ ara ni 100% metanol (aaya 10)”.Oye mi ni pe o dara lati rẹ fun o kere ju iṣẹju-aaya 10.Ni otitọ, o dara lati rẹ fun iṣẹju 10 tabi iṣẹju mẹwa 10.

(2) Gbigbe

A. Dubulẹ kekere àlẹmọ iwe lori ina gbigbe irinse.Ni gbogbogbo, awọn ipele mẹta ni a lo.

B. Fi awọ ara lelẹ lori iwe àlẹmọ lodi si awọ ara ilu, ṣe akiyesi lati ma ni awọn nyoju laarin awọ ara ilu ati iwe àlẹmọ, ki o si tú diẹ ninu ifipamọ gbigbe sori awọ ara ilu lati jẹ ki awo naa tutu.

C. Pe lẹ pọ, yọ jeli akopọ ati ki o farabalẹ gbe lọ si fiimu naa.

D. Ge apa osi oke ti fiimu naa ki o samisi ipo lẹ pọ lori fiimu pẹlu ikọwe kan.

E. Bo kan nkan ti àlẹmọ iwe lodi si awọn lẹ pọ lori lẹ pọ.Tú diẹ ninu ifipamọ gbigbe ki o dubulẹ awọn ege meji ti iwe àlẹmọ.

F. Fi sori ẹrọ ohun elo gbigbe ina ati yan lọwọlọwọ ati akoko ti o nilo ni ibamu si awọn iwulo.

G. Lakoko ilana gbigbe, iyipada foliteji yoo ṣe akiyesi ni eyikeyi akoko, ati pe eyikeyi aiṣedeede yoo tunṣe ni akoko.